标题摘要内容
 circRNA服务

circRNA服务
circRNA干扰技术服务
来源: | 作者:geneseed | 发布时间: 2017-09-03 | 2505 次浏览 | 分享到:

RNA干扰 (RNA interference, RNAi)技术,是将与内源mRNA 编码区同源的小片段(19 23bp)外源双链 RNAsiRNA)导入细胞中,引发细胞中相应mRNA 高效特异性降解,从而导致特定基因表达沉默(knock down)的一种实验技术。吉赛生物针对circRNA的接头序列设计siRNA序列特异性敲低目的circRNA的表达。对于每条选定的siRNA靶序列,设计 siRNA 正义链和反义链,以 loop(9nt or 10nt) 相连,形成稳定的发卡RNA,即为 shRNAshort hairpin RNA),可构建shRNA质粒直接转染或通过病毒包装后转染细胞,并对转染细胞进行阳性鉴定和转代细胞株的培养,最终实现对特定circRNA特异性敲低的作用。

 

 

我们的优势

设计多条siRNA,筛选高效率干扰siRNA

设计circRNA特异性引物,检测敲低circRNA的效率;

构建shRNA载体,包装干扰慢病毒,可进行稳定干扰细胞系构建。

 

 

案例

 

针对circRNA circPAIP2进行siRNA敲低实验示意图 

 

 

实验名称

项目内容

周期(工作日)

备注

circRNA siRNA筛选

siRNA设计和合成

15

1条阴性对照及3siRNA

细胞转染(客户提供细胞)

PCR干扰效率验证

circRNA shRNA载体构建

载体构建

20

1.一条shRNA质粒,2.对照shRNA质粒,3.干扰验证报告

细胞转染(客户提供细胞)

PCR干扰效率验证

病毒包装

慢病毒包装

20

过表达病毒液108 TU/ml1ml

赠送对照病毒液

稳定细胞株构建检测

circRNA稳定细胞株筛选

20

病毒感染后筛选,检测过表达效率