产品简介
Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。
本实验适用于验证circRNA sponge功能，当miRNAs被 circRNA吸附，理论上细胞内miRNA的总量不会产生变化，因此无法通过qRT-PCR检测来判断miRNA是否吸附。我公司利用psiCHECK2质粒，对miRNAs与circRNA的关系作出准确判断，其原理简述如下：
1 构建一个将circRNA特定片段插入到荧光素酶报告基因质粒psiCHECK2中；
2 将要检测的miRNA与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。如果此miRNA能够与circRNA结合，则荧光素酶基因就会下调，荧光素酶的表达量与miRNA-circRNA的作用强度成反比；
3 如果将circRNA序列具有 sponge功能的片段进行突变，则质粒与miRNA共转染到细胞中，荧光素酶的表达量将不再受miRNA的影响。
技术优势
1 采用psiCHECK2质粒Luciferase双荧光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；
2 采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。
实验提供
1 克隆含有circRNA或结合位点序列的报告质粒；
2 详细实验结果报告与数据分析。
