标题摘要内容
 circRNA服务

circRNA服务
circRNA RIP实验
来源: | 作者:geneseed | 发布时间: 2017-09-03 | 14888 次浏览 | 分享到:

RNA免疫沉淀RIP运用针对目标蛋白质的抗体把相应的RNA-蛋白质复合物沉淀下来,经过分离纯化并对结合在复合物上的RNA进行测序或PCR分析。RIP可应用于研究miRNA调节靶点、RNARNPRNA结合蛋白)的互作关系等。


 

实验流程:
1.细胞裂解
2.捕获RNA-蛋白复合物
3.洗脱
4.检测


实验实例:

       以anti-SNRNP70为目的抗体,anti-IgG为对照抗体,在Hela细胞裂解样本中,进行免疫沉淀。免疫沉淀所得蛋白质样品,进行Western blot检测,input样本与目的样本在约70KDa大小位置有明显条带,阴性对照样本无条带。

       免疫沉淀所得RNAU1 snRNA特异性引物,进行RT-PCR分析,input样本与目的样本可见明显的PCR产物,指示SNRNP70富集U1 snRNA


Western blot检测:

     

RNA 检测:

 

 

电泳跑胶图:

 


 

PCR检测结果