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Exosome(外泌体)提取试剂
来源: | 作者:geneseed | 发布时间: 2017-09-03 | 2964 次浏览 | 分享到:

Exosome (外泌体)是活细胞分泌的直径约为30-150nm的膜性囊泡,天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳。Exosome携带了包含细胞溶质蛋白、参与细胞内信号转导的蛋白、各种代谢酶、热休克蛋白和四跨膜蛋白及特殊蛋白质,参与细胞活动的重要调控,有望成为多种疾病的早期诊断标志物。Exosome在作为基因和药物运载、肿瘤肿瘤和肿瘤生物学研究方面已经成为热点。




沉淀法

GSTM Exosome Isolation Reagent是用于快速高效地从血清血浆、细胞培养上清、脑脊液和尿液中提取exosome的试剂盒,仅需通过简单混匀和常规离心即可从样本中获取大量结构完整的exosome,比传统的超速离心法节省时间和样本。以GSTM Exosome Isolation Reagent提取的exosome可根据实验目的用于后续多种实验,应用范围广泛。

 

我们的优势

操作简单,无需超速离心,省时省力;

纯度高,富集量大,应用范围广;

获取的Exosome结构和功能完整;

稳定性好,便于运输,便于保存。

 

运输保存

       产品常温运输。收到产品后,请于4℃保存,可以稳定保存一年。

 

本试剂提取exosome电镜下原始图

 

 

本试剂提取exosome粒径检测图

 

本试剂提取exosome质谱峰图

 产品规格



柱提法

GSTM Exosome Isolation Kit(柱提式)应用了柱提式的提取分离技术,一步法分离出血浆/血清/细胞上清液中的外泌体,调节结合条件后,外泌体被吸附在柱子的膜上,而杂质不被吸附而去除。柱子经洗涤后去除杂质,最后洗脱出外泌体。得到的外泌体可用于WB、质谱、QPCR检测、高通量测序等实验。

我们的优势

操作简易:不需要超速离心,分离时间小于1小时;

高得率:分离的外泌体颗粒量可媲美超速离心;

分离高纯度的外泌体:外泌体纯度>95%;

分离的外泌体形态完整。

 

运输保存:
        
产品常温运输。收到产品后,请于常温保存,可以稳定保存一年。

 

样本要求:

QPCR检测:500-1000 μL血清/血浆,10 mL细胞上清液。

WB/质谱检测:500-1000 μL血清/血浆,10 mL细胞上清液。

高通量测序:2-4 mL血清/血浆,20-30 mL细胞上清液。

 

本试剂盒分离的外泌体鉴定

        根据国际细胞外囊泡协会于2014年发表的一个指导手册(MISEV),鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中,通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征,通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征(粒子浓度、直径分布等)。

 

外泌体WB检测(本试剂盒与PEG原理的试剂盒对比)

 

1 比较血清、血浆在PEG试剂盒及本试剂盒中CD9的WB检测

Western Blot进行外泌体鉴定,CD9条带清晰可见。本试剂盒提取的外泌体蛋白检测条带单一,纯度比PEG原理的提取试剂盒更高。

 

外泌体电镜检测

 

2 本试剂盒提取的血清外泌体电镜图

电镜结果显示,外泌体呈囊泡状,粒径大小约为120 nm,与文献中报道的30-150 nm一致。

外泌体粒径检测


3 本试剂盒提取的外泌体的NTA检测图

Nanosight进行粒径检测,粒径均一,平均粒径为128 nm ,与文献报道相符。



产品规格



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