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 其他实验

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克隆形成率
来源: | 作者:geneseed | 发布时间: 2017-09-03 | 1949 次浏览 | 分享到:

细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。



服务流程 
        1)取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞,并把细胞悬浮在完全培养基中备用;
        2)将细胞悬液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每孔50100200个细胞的梯度密度分别接种含2mL 37℃预温培养液的六孔板中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置375% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养23周;
        3)经常观察,当培养板中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。弃去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞1mL固定15分钟。然后去固定液,加适量GIMSA应用染色液染1030分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥;
        4)将平皿倒置白色纸片上,用肉眼直接计数克隆,或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。

克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)×100% 
客户提供 
        实验细胞和细胞处理方案
我们提供 
        实验结果与实验方法报告单。

 


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