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人类心脏翻译组学研究 The Translational Landscape of the Human Heart Cell (2019). DOI: 10.1016/j.cell.2019.05.010(IF:36.216) 测序策略:Ribo-seq & mRNA-seq 样本分组:80例心脏组织,65例心肌病,15例正常对照 本研究对65例扩张性心肌病(DCM)患者左心室心肌组织和15例正常对照者的左心室心肌组织进行mRNA测序(mRNA-seq)及核糖体印迹测序(ribo-seq),分析了DCM与健康对照组被翻译的RNA分子总体情况,结合之前一项心脏组织蛋白质组学的数据,系统分析了左心室心肌组织中被翻译的ORF和对应的蛋白或多肽的总体信息。共发现1090个uORF、 20763个传统的ORF以及74个dORF。还包括了来自于169个lncRNA 的339个sORF(图1)。此外,本文通过分析ribo-seq数据中被核糖体捕获的circRNA接口序列找到了40个可翻译的circRNA分子。作者分析接口位置Reads的条件是不少于9nt的跨接口碱基,在不少于3个样本且总Reads数不少于5个的才算有效的可翻译circRNA(图2)。这40个circRNA来自39个基因,其中有6个circRNA的翻译产物在早期的蛋白质组学研究中有对应的质谱线索。40个circRNA中也不乏大家耳熟能详的明星分子,包括CDR1as等等。其中circCFLAR,circSLC8A1,circMYBPC3和circRYR2是首次发现的心肌中可被翻译的circRNA分子。 Figure1. 心脏翻译组学研究概览 生物信息分析 基础分析 原始数据质控检查 比对结果质控 reads 在基因组上的分布分析 基因覆盖度分析 翻译图谱刻画:P-site定义确认 翻译图谱刻画:ORFs统计与对应的氨基酸序列分析 高级分析 翻译组差异基因表达分析 翻译组差异基因GO功能分析 翻译组差异基因KEGG通路分析 翻译组差异基因Rectome通路分析 circRNA翻译事件识别分析 翻译组差异circRNA宿主基因GO功能分析 翻译组差异circRNA宿主基因KEGG通路分析 翻译组差异circRNA宿主基因Rectome通路分析 翻译组差异circRNA的靶向miRNA预测分析 翻译组差异circRNA及靶向miRNA网络调控制图 差异circRNA翻译潜能预测分析 个性化分析 TE翻译效率分析 差异TE基因表达分析 差异TE基因聚类分析 差异TE基因GO/KEGG富集分析 部分结果示例 图1. P-site 评估样图 图2. ORF类型数量统计图 图3. Riboseq差异表达基因的火山图 Table1. Ribo-seq原始样本送样建议
*翻译组测序的细胞样本处理方法和转录组测序不一样,具体处理、保存和运输方法请咨询技术支持。 物种范围:人、小鼠、大鼠,其他物种请详询销售或技术支持 |