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circRNA qRT-PCR试剂盒
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12 CircRNA qRT-PCR Kit-50 rxn RT+500 rxn qPCR.jpg


吉赛生物针对circbase公布的10万个circRNA信息,经过团队的不断努力,已建立了20000多种circRNA引物库,每一对引对物已经过严格的筛选及验证,为科研工作者提供了一个可靠的科学研究的资源库,避免了不必要的试剂成本投入,大大缩短因摸索实验条件耗费的实验周期。


产品特点

1.自由定制,方便快捷,只需发送circbase ID号,私人订制您专属的检测试剂盒,轻轻松松对样本进行检测(全国一周内到货)。

2.验证引物,吉赛生物首建“circRNA引物库”已验证特异性引物达到20000多对,可帮助客户节省大量引物设计和测试时间,可有效保障实验快速成功。


产品信息

产品名称

货号

规格

目录价(元)

存温度

GENESEED®circRNA qRT-PCR Kit

GS0201

50 rxns RT+500 rxns qPCR

2980

-20℃

GS0202

50 rxns RT

1400

GS0203-1

300 rxns qPCR

1580

GS0203-2

500 rxns qPCR

1880

GS0203-3

1000 rxns qPCR

2380










[1] IF13.493 The circFASN/miR-33a pathway participates in tacrolimus-induced dysregulation of hepatic triglyceride homeostasis. Signal Transduction and Targeted Therapy


[2] IF13.493 The circFASN/miR-33a pathway participates in tacrolimus-induced dysregulation of hepatic triglyceride homeostasis. Signal Transduction and Targeted Therapy


[3] IF9.229 In Vitro Study on the Piezodynamic Therapy with a BaTiO3-Coating Titanium Scaffold under Low-Intensity Pulsed Ultrasound Stimulation. ACS Applied Materials & Interfaces


[4] IF9.229 In Vitro Study on the Piezodynamic Therapy with a BaTiO3-Coating Titanium Scaffold under Low-Intensity Pulsed Ultrasound Stimulation. ACS Applied Materials & Interfaces


[5] IF8.886 Effects of long-term culture on the biological characteristics and RNA profiles of human bone-marrow-derived mesenchymal stem cells. Molecular Therapy-Nucleic Acids


吉赛生物GENESEEDt®circRNA qRT-PCR Kit Cat.No.GS0203.pdf
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吉赛生物GENESEEDt®circRNA qRT-PCR Kit Cat.No.GS0202.pdf
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吉赛生物GENESEED®circRNA qRT-PCR Kit Cat.No.GS0201.pdf
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A常见问题

1、如何设置溶解曲线的温度?

我们做测试的时候用的是ABI
7500
的仪器,溶解曲线的设置都是仪器默认的,所以溶解曲线用仪器默认的即可。


2、GS0201-2试剂盒只能用于circRNA的逆转录吗?

不是的,也可用于普通的mRNA和LncRNA的逆转录。


3、Reverse Transcription Primer中是否均包含Oligo dT和随机引物,还是只包含其中一种引物?

包含了Oligo dT和随机引物。


4、我们的荧光定量PCR试剂盒有哪些优点?

扩增效率高和特异性好。


5、在配置qPCR的反应液时,反应体系为20ul,模板量应加多少合适?

建议用1ugRNA进行逆转录,逆转录后的产物稀释5-10倍,取2ul cDNA进行qPCR反应。可根据客户的实验要求进行适当的调整。


6、GS0201-2试剂盒可用于cfRNA的逆转录吗?

可以的。


7、GS0201试剂盒的引物设计合成需要我们提供哪些信息?

需要提供种属信息、相关的circRNA ID号和序列。


8、里面master mix中是否可以直接跑电泳,还需要上样缓冲液么?

需要加


9、CT 值出现太晚或检测为阴性

     a. 扩增效率极低:优化反应条件,尝试三步法扩增程序。

     b. 模板浓度太低:减少稀释度重复试验,一般未知浓度的样品先从最高浓度做起。

     c. 模板降解:重新制备模板,重复试验。


10、反应结束无扩增曲线出现

     a.   circRNA 在细胞株或组织中不表达:更换模板。

     b.   反应循环数不够:一般设置循环数为 40,但需要注意的是过多的循环数会增加过多的背景信号,

           降低数值可信度。

     c.   确认程序中是否设置了信号采集步骤:两步法扩增程序一般将信号采集设置在退火延伸阶段;

         三步法扩增程序应当将信号采集设置在 72℃延伸阶段。

     d.   模板浓度太低:减少稀释度重复试验,一般未知浓度的样品先从最高浓度做起。

     e.   模板降解:重新制备模板,重复试验。


11、阴性对照也出现明显扩增

     反应体系或水被污染:更换新的 Mix 或者水重复试验。反应体系在超净工作台内配置,减少气溶胶污染。


12、实验重复性差

     a. 加样体积失准:使用性能较好的移液枪,扩大反应体积,将模板做高倍稀释,以大体积加入反应体系中。

     b. 定量 PCR 仪不同位置温度控制不一致:定期校准仪器。

     c. 模板浓度太低:模板浓度越稀,重复性越差,较少模板稀释度或者提高加样体积。


13、本产品是否可以 4℃储存

     a. 不可以。4℃储存将会导致产品活性下降。

     b. 该产品-20℃储存可以长期保持活性,推荐-20℃储存。

     c. 因反复冻融也可能导致产品活性下降,因此当每次用量较小时,推荐小体积分装后-20℃储存。


B注意事项

1本产品尽量避免反复冻融,以免酶活下降。如每次使用量较少,推荐小份分装使用。


2使用前请上下颠倒混匀,请勿涡旋以免产生过多气泡引起反应体系失准,进而影响定量结果。

混匀后轻微离心后即可使用。如操作不慎产生气泡,请再次离心后使用。


3由于产品中的 2×qPCR SYBR Green Master Mix 含有荧光染料 SYBR Green I, 因此无论保存 Mix

还是配置反应体系时都应该尽量避免强光照射。



地址:广州科学城掬泉路 3 号国际企业孵化器 D 区 706-707

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