[1] IF2.447 miR‑124 promotes apoptosis and inhibits the proliferation of vessel endothelial cells through P38/MAPK and PI3K/AKT pathways, making it a potential mechanism of vessel endothelial injury in acute myocardial infarction. Experimental and Therapeutic Medicine

A常见问题

1、RNA 产量低

①　洗脱效率低：使用不低于30 μL RNase-Free H2O 进行洗脱，并悬空直接加到膜上，加入后室温静置 2 分钟再离心。

②　样品用量太多：样品用量太多容易降低裂解效率，从而导致RNA 产量低，建议减少样品用量。

2、gDNA 残留：DR Columns 一般可去除 95 ~ 99%的 DNA 污染，若 gDNA残留过多，可增加额外的 DNase I 消化进一步去除 DNA 污染。

B注意事项

1、10×红细胞裂解液在使用前应用 DEPC 水稀释至 1×，并装在合适的 RNase-Free 瓶子中。

2、GS Lysis Reagent 在储存时可能会形成沉淀，若有沉淀请 60℃水浴加热溶解后使用。

3、GS Lysis Reagent 在使用前应先加入β-Mercaptoethanol 至终浓度为 1%（例如 1 ml GS Lysis Reagent 中加入 10 μL β-Mercaptoethanol），加入β-Mercaptoethanol 的 GS Lysis Reagent 可 于 4℃放置一个月，但现配现用能达到最优使用效果。

4、Buffer WB 1 与 Buffer WB 2 在使用前应按照标签说明加入无水乙醇。

5、单个样品中最多可处理 1×10 7个白细胞，健康人体血液中白细胞含量为 4000 ~ 7000 个/μL， 病人血液中白细胞含量可能会升高，此时可减少血液的用量。

6、血液收集最好使用 EDTA 进行抗凝，并尽快提取 RNA 或于 2 ~ 8℃短时保存，避免冻存。