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细胞RNA提取试剂盒
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16 Cell RNA lsolation Kit(50preps).jpg


产品简介
       
试剂盒采用柱纯化技术,适合从少于1×107个培养细胞样品中提取总RNA。提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,无需进行耗时的醇类沉淀,整个过程只需20 ~ 30分钟。试剂盒结合DNA过滤技术,可高效去除基因组DNA污染。得到的RNA纯度高,可用于RT-PCR、荧光定量PCR、高通量测序、Northern Blotpoly A筛选、体外翻译和分子克隆等多种实验。

产品特点

        1 高品质:双柱法分离高纯度的总RNA,适合下游对RNA纯度要求高的实验。

        2 快速:柱式纯化方式,无需进行耗时的醇类沉淀,可在20 ~ 30分钟内完成数个样品的提取。

        3 安全:无需酚/氯仿抽提。

下游应用

        RT-PCRReal Time RT-PCR、高通量测序、Northern BlotDot BlotPoly A 筛选和分子克隆等。

实验例

        提取3种细胞样品的总RNA(各2个重复),电泳结果显示RNA完整性好,重复性良好。RNA上样量300 ngMDL2000 Marker,琼脂糖凝胶浓度为1.5%6V/cm电泳30 min


产品信息

名称

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GENESEED®Cell RNA Isolation Kit

E0204

50 rxns

800

常温









[1] IF3.94 LncRNA MALAT1 inhibits the proliferation and invasiveness of laryngeal squamous cell carcinoma Hep-2 cells by modulating miR-362-3p. American Journal of Translational Research



[2] IF3.269 Lumican silencing alleviates tumor necrosis factor-α-induced nucleus pulposus cell inflammation and senescence by inhibiting apoptosis signal regulating kinase 1/p38 signaling pathway via inactivating Fas ligand expression. Bioengineered






吉赛生物GENESEED®Cell RNA Isolation Kit Cat.No. E0204.pdf
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A常见问题

1、 GS Lysis Reagent和Buffer WB 1出现沉淀影不影响使用效果?

这是正常现象,60℃水浴加热可使沉淀溶解,不影响使用效果。

2、 E0204试剂盒是否可以用于组织样本的提取?

没有进行组织样本的测试。

3、 E0204试剂盒是否可以用于血清/血浆样本的提取?

不可以,血清/血浆样本中小片段RNA较多,RNA硅胶柱对小片段的RNA吸附作用差一些。

4、 E0204试剂盒是否可以提取游离RNA。

不可以,RNA硅胶柱对小片段的RNA吸附作用差一些。

5、 E0204试剂盒能提取血液和体液样本吗?

血液有专门的提取试剂盒,货号E0203。不能用于体液样本的RNA提取。

6、RNA 产量低

① 洗脱效率低:使用不低于30 μL RNase-Free H2O 进行洗脱,并悬空直接加到膜上,加入后室温静置 2 分钟再离心。

② 样品用量太多:样品用量太多容易降低裂解效率,从而导致RNA 产量低,建议减少样品用量。

6、 gDNA 残留:DR Columns 一般可去除 95 ~ 99%的 DNA 污染,若 gDNA残留过多,可增加额外的 DNase I 消化进一步去除 DNA 污染。



B注意事项

1、10×红细胞裂解液在使用前应用 DEPC 水稀释至 1×,并装在合适的 RNase-Free 瓶子中。

2、GS Lysis Reagent 在储存时可能会形成沉淀,若有沉淀请 60℃水浴加热溶解后使用。

3、GS Lysis Reagent 在使用前应先加入β-Mercaptoethanol 至终浓度为 1%(例如 1 ml GS Lysis Reagent 中加入 10 μL β-Mercaptoethanol),加入β-Mercaptoethanol 的 GS Lysis Reagent 可 于 4℃放置一个月,但现配现用能达到最优使用效果。

4、Buffer WB 1 与 Buffer WB 2 在使用前应按照标签说明加入无水乙醇。

5、单个样品中最多可处理 1×10 7个白细胞,健康人体血液中白细胞含量为 4000 ~ 7000 个/μL, 病人血液中白细胞含量可能会升高,此时可减少血液的用量。

6、血液收集最好使用 EDTA 进行抗凝,并尽快提取 RNA 或于 2 ~ 8℃短时保存,避免冻存。



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