耐热性强：

GSPure®T7 Thermostable and High Yield RNA Synthesis Kit在50℃下仍能保持活性并高效转录。

转录长度范围广：

GSPure®T7 Thermostable and High Yield RNA Synthesis Kit在合成300~6000nt长度的转录本时保持优良的转录效果。

转录产量高：

GSPure®T7 Thermostable and High Yield RNA Synthesis Kit的30μL反应体系中，1μg DNA模板投入可合成250~300μg RNA。

1、低产量全长RNA

如果转录模板是产生全长的RNA，其产量可能明显低于预期；DNA模板里包含的污染物可能会抑制RNA聚合酶的活性，或者可能由于DNA的浓度不正确。或者说，DNA模板可能需要额外的纯化,建议用酚氯仿抽提法。

2、低产量短转录本

短转录本（<0.3 kb）的高产量可以通过增加孵育时间和增加模板的量来获得。孵育反应长达16 h或者使用多达2 µg的模板将会有助于实现最大产量。

3、RNA产物片段大于预期

如果电泳显示产物条带大于预期，可能原因：①质粒模板可能没有完全线性化；②有义链3'端为突出结构；③RNA存在未完全变性的二级结构。建议确认模板结构，并将电泳方式由琼脂糖胶换成变性胶来检测RNA产物。

4、RNA转录本在变性胶中污染

如果RNA开始出现在变性的聚丙烯酰胺胶或琼脂糖凝胶上（例如污染），这意味着RNA酶污染了DNA模板。污染有RNA酶的DNA模板会影响合成转录本的长度（比预期的的转录本短）。如果质粒模板污染了RNA酶，有必要用酚氯仿方法抽提一遍，再沉淀DNA，用RNase-free Water溶解

5、转录产物产量低

模板与产量密切相关，实验组产量明显低于对照组，可能原因：①实验模板中有抑制反应的成分；②实验模板本身原因。建议做一个对照组，一个实验组。若对照组产量正常但实验组产量低，说明实验模板本身原因导致产低，请尝试以下方案解决：

a.重新纯化模板；b确定模板定量以及其完整性；c.延长37℃反应时间；d.加大模板投入量；e.尝试其它的启动子和RNA聚合酶。

6、产物电泳拖尾现象

电泳过程中有拖尾现象，可能原因：①实验操作过程被RNA酶污染；②DNA模板被RNase污染。体系中的RNA酶抑制剂只能抑制痕量的RNA酶残留，建议重新纯化模板DNA，并在实验过程中使用RNase-free的枪头和EP管，佩戴一次性乳胶手套和口罩，所有试剂均用RNase-free ddH₂O配制。