产品简介
RNA免疫沉淀(RIP)运用针对目标蛋白质的抗体把相应的RNA-蛋白质复合物沉淀下来,经过分离纯化并对结合在复合物上的RNA进行测序或PCR分析。RIP可应用于研究miRNA调节靶点、RNA与RNP(RNA结合蛋白)的互作关系等。
实验流程
1 细胞裂解
2 捕获RNA-蛋白复合物
3 洗脱
4 检测
实验实例
以anti-SNRNP70为目的抗体,anti-IgG为对照抗体,在Hela细胞裂解样本中,进行免疫沉淀。免疫沉淀所得蛋白质样品,进行Western blot检测,input样本与目的样本在约70KDa大小位置有明显条带,阴性对照样本无条带。
免疫沉淀所得RNA以U1 snRNA特异性引物,进行RT-PCR分析,input样本与目的样本可见明显的PCR产物,指示SNRNP70富集U1 snRNA。
Western blot检测SNRNP70:
PCR检测U1 snRNA: