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  • 10xVisium空间转录组测序
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  • 送样建议

  • 组织切片的细胞中会释放出mRNA,通过poly-T捕获带有poly-AmRNA,迁移到每个spotmRNA会被标记上相应的barcode序列,然后进行文库构建并测序。最后,根据数据的条形码信息对数据进行分析,以确定哪些数据来自哪个位置,从而实现空间基因表达的可视化。

    47 10×Visium空间转录组测序.png

    10×Visium空间转录组测序技术路线



    测序方
    测序平台Illumina Novaseq 6000/NovaSeq X Plus

    测序模式PE150

    测序数据量≥50 k reads pairs per spot



  • 生物信息分析

    原始序列数据

    测序数据质量评估过滤

    Spot质控

    数据比对

    数据标准化

    Spot聚类分群

    Spot亚群分析

    Marker分析

    细胞类型鉴定

    解剖区域注释

    细胞通讯分析

    样本间差异分析

    注释区域间差异分析


    部分结果示例


    图1.Spot聚类与图像整合


    图2.小鼠大脑空间分辨率的基因表达模式图



    图3.图1小鼠肾脏空间转录组的mRNA表达及聚类图




  • Table.空间转录组原始样本送样建议

    送样类型

    送样量

    备注

    新鲜组织

    OCT冷冻包埋送样;组织大小建议6.5mm^3

    包埋模具上表明组织的方向,以便后续确认切片方向

    FFPE

    包埋组织大小建议6.5mm^3

    DV200>50%


    *皮肤、胰腺以及骨头组织暂时不适进行空间转录组测序,更具体的送样方法请详询销售或技术支持

    物种范围:人、小鼠、大鼠,其他物种请咨询销售或技术支持



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