RNA制备工具酶系列之酶法加帽试剂盒

发布时间:2024-07-02        浏览量:[ 67 ]


酶法加帽试剂盒

酶法加帽试剂盒包含牛痘病毒加帽酶(Vaccinia Capping Enzyme)、mRNA Cap 2´-O-甲基转移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)及其他加帽相关组分,可在无帽结构的mRNA 5’端加入cap0或cap1结构。该结构与真核生物体内天然帽结构完全一致,可显著降低外源 mRNA的免疫原性,增强其稳定性,并提高翻译效率。


本试剂盒中的牛痘病毒加帽酶来源于携带牛痘病毒MR的重组大肠杆菌,该酶由D1R、D12L双亚基组成,具有三种酶活性(RNA三磷酸酶活性、鸟苷酸转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性),D1亚基执行RNA三磷酸酶和鸟苷转移酶的功能,D12亚基执行鸟嘌呤甲基转移酶的功能,能特异性将7-甲基鸟苷酸帽子结构(Cap 0) 加至RNA的5'端。mRNA Cap 2´-O-甲基转移酶来源于携带有牛痘病毒mRNA Cap 2´-O-甲基转移酶基因的重组大肠杆菌菌株。该酶可以利用S-腺苷甲硫胺酸(SAM)作为甲基供体来甲基化加帽RNA(Cap 0),从而形成Cap 1结构,即在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置上添加一个甲基基团。


Cap 1加帽系统催化四种酶促反应:①RNA三磷酸酶将RNA 5'-三磷酸裂解为二磷酸;②RNA 鸟苷酸转移酶将GTP连接到RNA N1的5'-二磷酸;③鸟嘌呤7-甲基转移酶,使用S-腺苷甲硫氨酸作为辅助因子,催化鸟嘌呤的7-氮甲基化;④mRNA Cap 2'-O-甲基转移酶能在Cap 0-RNA 5′末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的2′-O上添加甲基基团。



图1. 牛痘病毒加帽酶与mRNA Cap 2´-O-甲基转移酶

参与的mRNA酶法加帽途径


01 产品介绍


产品规格




性能优势


本试剂盒一个反应能够为50μg RNA完成加帽,并可放大生产毫克级别的RNA。加帽后mRNA 翻译效率提高,可显著改善mRNA在转染和显微注射实验中的表达。


运输与保存


≤0℃运输;-25℃~-15℃条件下可保存一年;避免反复冻融。


02 说明书

酶法加帽试剂盒

扫码即可查看


吉赛生物GSPure® Cap1 capping system Cat.No.R0413